PCR de transcrição reversa

A reação em cadeia da polimerase da transcrição reversa (RT-PCR) é uma técnica de laboratório que combina a transcrição reversa do RNA no DNA (nesse contexto chamado DNA ou cDNA complementar) e amplificação de alvos específicos de DNA usando reação em cadeia da polimerase (PCR).

1. Como a transcriptase reversa é usada em PCR?
2. Você precisa de transcriptase reversa para PCR?
3. O que é transcrição reversa?
4. Por que o cDNA é usado para PCR?

Como a transcriptase reversa é usada em PCR?

Ele usa uma enzima chamada transcriptase reversa para mudar uma peça específica de RNA em um pedaço de DNA correspondente. Este pedaço de DNA é então amplificado (fabricado em grande número) por outra enzima chamada DNA polimerase. As cópias amplificadas de DNA ajudam a saber se uma molécula de mRNA específica está sendo feita por um gene.

Você precisa de transcriptase reversa para PCR?

PCR de transcrição reversa, ou RT-PCR, permite o uso do RNA como modelo. Uma etapa adicional permite a detecção e amplificação do RNA. O RNA é transcrito reverso para o DNA complementar (cDNA), usando transcriptase reversa. A qualidade e a pureza do modelo de RNA são essenciais para o sucesso do RT-PCR.

O que é transcrição reversa?

Ouça a pronúncia. (Ree-vers Tran-skrip-shun) Em biologia, o processo nas células pelas quais uma enzima faz uma cópia do DNA do RNA. A enzima que faz a cópia do DNA é chamada de transcriptase reversa e é encontrada em retrovírus, como o vírus da imunodeficiência humana (HIV).

Por que o cDNA é usado para PCR?

A reação em cadeia da polimerase

Transcrição reversa (RT) -PCR é usada para amplificar os alvos de RNA. O modelo de RNA é convertido em DNA complementar (c) pela transcriptase reversa da enzima. O cDNA serve posteriormente como modelo para amplificação exponencial usando PCR.